葉綠素?zé)晒猓鳛楣夂献饔醚芯康奶结?,得到了廣泛的研究和應(yīng)用。葉綠素?zé)晒獠粌H能反映光能吸收、激發(fā)能傳遞和光化學(xué)反應(yīng)等光合作用的原初反應(yīng)過程,而且與電子傳遞、質(zhì)子梯度的建立及ATP合成和CO2固定等過程有關(guān)。
幾乎所有光合作用過程的變化均可通過葉綠素?zé)晒夥从吵鰜?,而熒光測(cè)定技術(shù)不需破碎細(xì)胞,不傷害生物體,因此通過研究葉綠素?zé)晒鈦黹g接研究光合作用的變化是一種簡(jiǎn)便、快捷、可靠的方法。
目前,葉綠素?zé)晒庠诠夂献饔?、植物脅迫生理學(xué)、水生生物學(xué)、海洋學(xué)和遙感等方面得到了廣泛的應(yīng)用。
葉綠素?zé)晒猬F(xiàn)象是由傳教士Brewster發(fā)現(xiàn)的。1834年Brewster發(fā)現(xiàn)當(dāng)一束強(qiáng)太陽(yáng)光穿過月桂葉子的乙醇提取液時(shí),溶液的顏色變成了綠色的互補(bǔ)色——紅色,而且顏色隨溶液的厚度而變化,這是歷對(duì)葉綠素?zé)晒饧捌渲匚宅F(xiàn)象的記載。
后來,Stokes(1852)認(rèn)識(shí)到這是一種光發(fā)射現(xiàn)象,并使用了“fluorescence”一詞。1874年,Müller發(fā)現(xiàn)葉綠素溶液稀釋后,熒光強(qiáng)度比活體葉子的熒光強(qiáng)得多。
盡管Müller提出葉綠素?zé)晒夂凸夂献饔弥g可能存在相反的關(guān)系,但由于他的實(shí)驗(yàn)沒有對(duì)照,實(shí)驗(yàn)條件控制不嚴(yán)格,因此人們并沒有將葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)(瞬變)現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)歸功于Müller。
Kautsky是*的葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)者。1931年,Kautsky和Hirsch用肉眼觀察并記錄了葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)現(xiàn)象(Lichtenthaler,1992;Govindjee,1995)。
他們將暗適應(yīng)的葉子照光后,發(fā)現(xiàn)葉綠素?zé)晒鈴?qiáng)度隨時(shí)間而變化,并與CO2的固定有關(guān)。他們得到的主要結(jié)論如下:
1)葉綠素?zé)晒庋杆偕叩阶罡唿c(diǎn),然后下降,最終達(dá)到一穩(wěn)定狀態(tài),整個(gè)過程在幾分鐘內(nèi)完成。
2)曲線的上升反映了光合作用的原初光化學(xué)反應(yīng),不受溫度(0℃和30℃)和HCN處理的影響。若在最高點(diǎn)時(shí)關(guān)掉光,則熒光迅速下降。
3)熒光強(qiáng)度的變化與CO2的固定呈相反的關(guān)系,若熒光強(qiáng)度下降,則CO2固定增加。這說明當(dāng)熒光強(qiáng)度降低時(shí),較多的光能用于轉(zhuǎn)變成化學(xué)能。
4)奇怪的是(照光后)CO2的固定有一個(gè)延滯期,似乎說明“光依賴”的過程對(duì)CO2固定過程的進(jìn)行是必需的。另一個(gè)未得到解釋的現(xiàn)象是若在熒光誘導(dǎo)結(jié)束后關(guān)掉光,則熒光水平的恢復(fù)需要很長(zhǎng)時(shí)間。
在Kautsky的發(fā)現(xiàn)之后,人們對(duì)葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)現(xiàn)象進(jìn)行了廣泛而深入的研究,并逐步形成了光合作用熒光誘導(dǎo)理論,被廣泛應(yīng)用于光合作用研究。由于Kautsky的杰出貢獻(xiàn),葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)現(xiàn)象也被稱為Kautsky效應(yīng)(Kautsky Effect)。